TF-1细胞系由T.Kitamura等人于年10月,从一名患有严重全血细胞减少症的35岁日本男性的肝素化骨髓抽吸样本中提取。TF-1细胞生长完全依赖于IL-3或GM-CSF,对IL-5无反应。多种淋巴因子和细胞因子对TF-1细胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。TF-1细胞不表达血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。
TF-1生长特性
半贴壁半悬浮
TF-1细胞系建立后,在添加10%FCS和5ng/mLGM-CSF的RPMI培养基中使用无涂层培养板培养;
TF-1细胞经常粘附于有涂层板的容器上(故常规TC处理的培养瓶会使之贴壁)。
依赖GM-CSF
在低浓度下(分别为0.01ng/mL或0.03U/mL),rhGM-CSF、rhIL-3或rhEPO也能促进TF-1细胞的生长;
rhGM-CSF、rhIL-3支持TF-1的持续生长,而rhEPO只能维持TF-1的短期生长和生存;
即使在无血清的化学定义培养基中,rhGM-CSF、rhIL-3或rhEPO也能促进TF-1细胞的生长,但在无血清的情况下,细胞增殖在一周后停止。
TF-1细胞形态
正常生长的TF-1细胞呈圆形或贴壁铺开,细胞脱落大量的细胞质颗粒,在培养物中积累,注意不要与细菌混淆(如图1)。
图1.TF-1正常生长形态
TF-1细胞直径15~20μm,核大而粗,经Wright-Giemsa染色后可以看到,多数细胞核仁颜色深,胞浆嗜碱性,胞浆泡多发,偶见多核细胞,虽然大多数细胞单一,但也有非常大的多核细胞(如图2)。
图2.TF-1细胞Wright-Giemsa染色
在透射电子显微镜下,细胞核呈锯齿状(如图3),扫描电子显微镜下,细胞呈绒毛状表面,有少量泡(如图4)。
图3.透射电子显微镜下的TF-1细胞
图4.扫描电子显微镜下的TF-1细胞
注意事项
TF-1细胞不太好养,如果细胞状态不是很好,可以补加一点血清;
因子对细胞作用很大,且细胞对因子依赖性强;
尽量少离心,可以直接补液。