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细胞培养环境详解pH值二氧化碳和温 [复制链接]

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上期内容,我们讲到了,细胞培养过程培养器皿的选择,本期内容,我们讲讲pH值、二氧化碳和温度的影响。

pH值

大多数正常的哺乳动物细胞系都能在pH值为7.4的环境中生长良好,而且不同细胞株间差异也并不大。

后来研究发现,有些转化细胞系在略微偏酸性的环境(pH7.0-7.4)中也能较好生长;而有些成纤维细胞系则更适合在略微偏碱性的环境(pH7.4-7.7)中生长;而某些昆虫细胞系在pH值为6.2的环境中生长情况更佳。

二氧化碳

细胞培养基中的一些成分,可以控制培养体系中的pH值,提供缓冲作用。一般情况下,该缓冲作用通过添加有机缓冲液(HEPES)或者碳酸氢盐缓冲液实现。

溶解态二氧化碳与碳酸氢根间的平衡,决定了培养基的pH值,因此,培养环境中空气中二氧化碳的含量变化,也会改变培养基的pH值。为此,使用含碳酸氢盐缓冲液的培养基时,需配合使用外源性二氧化碳。

温度

某种细胞体外培养时所需适宜温度,主要取决于该供体物种的体温,以及解剖部位体温(同一物种不同组织培养温度可能不同)。通常情况下,高温对细胞培养的影响大于低温。总的来说,温度控制建议在以下范围:

1、大多数人类和哺乳动物细胞系在36°C——37°C下具有比较好的生长状态。

2、昆虫细胞在27°C下培养状态较好;它们在高于或低于该温度,生长较慢。当培养温度高于30°C时,会降低昆虫细胞的存活率。

3、禽类细胞系则需要38.5°C可实现更好的生长。

4、源自冷血动物,比如两栖类生物,冷水生活的鱼类的细胞系,适宜生长的温度则更宽,15°C至26°C范围内,均有比较好的生长状况。

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