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原代细胞VS细胞系 [复制链接]

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原代细胞

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说,从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞,绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关),再加上取材,成本等因素,通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

细胞系原代细胞一般传至10代左右,大部分细胞衰老死亡,但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,存活的细胞一般能够传到40-50代,叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”,这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点,从而可能无限制地传代下去,称为细胞系。也有认为细胞系(cellline)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞,广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法,从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株(CellStrain)。细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。细胞株鉴定对于科研实验来说十分重要。因为使用错误识别(misidentified)或交叉污染(cross-contaminated)的细胞株可能会导致实验结果不正确、影响研究结论的有效性(validity)。并会大量浪费时间、实验资源和项目资金。如果在医学研究中使用错误识别或被污染的细胞株,可能会对实验中的人类受试者产生潜在伤害。细胞株鉴定对于实验可重复性(reproducibility)也很重要,正确的细胞株能够保证其他研究人员顺利的对实验结果与研究结论完成验证。另外,细胞株鉴定在一定程度上也会提升科研过程中的透明度(transparency)、防止出现学术欺诈的行为。目前可以对所有类型的细胞(包括动物细胞、人细胞和植物细胞)进行细胞株鉴定。但是,所用的鉴定方法具体要取决于细胞的类型。就人源细胞株而言,由于针对人类的STR分型技术已经相当成熟并且人源细胞数据库的STR信息也很完备,所以对人源细胞进行鉴定时,首先的方法就是STR分型。

原代细胞VS细胞系

原代细胞更接近体内环境研究模型原代细胞则不存在“错误鉴定和交叉污染”以及“显著基因突变“问题,原代细胞作为更接近体内环境的研究模型,可让你的研究结论更加接近“事实”,且原代细胞的使用可减少动物实验所需的成本开支。

原代细胞和细胞系在药物剂量上差异

通过细胞系获得的数据不容易在体内模型中复制。所以使用细胞系得出的结果,可能需要在体外的动物实验中花费大量的时间和成本来验证。

图1:HEK,HRE(人肾上皮细胞),HRCE(人肾皮质上皮)在喜树碱的EC50上有着显著的差异

原代细胞具有多样性

同一细胞类型,在不同的组织来源,不同的批次间也会显示出一些差异,但是这种多样性是在细胞系中完全无法呈现的。

图2:基因表达谱显示内皮细胞的多样性?14个不同的组织?53个不同的批次

可以对原代细胞进行细胞株鉴定嘛?原代细胞可以进行细胞株鉴定的。如果实验中有用到原代细胞(例如从病人体内获取的细胞),建议也做下鉴定。首先,不管原代细胞还是永生化的细胞株,在投稿时,期刊的编辑部都会要求作者提供细胞株鉴定报告。第二,对原代细胞进行鉴定,虽然不能直接确定细胞身份(数据库中未收录原代细胞数据),但可以排除是否存在污染、排除是否为数据库中其他已知细胞。

以上内容由海星生物(

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