无酶细胞消化液
产品货号：T
产品规格：ml
产品简介：
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶经常用于动物组织的培养细胞消化或者一些组织的消化，但对细胞有的潜在损害，尤其是在37℃环境下危害较大。
无酶细胞消化液(Non-enzyCellDetachSolution)不含胰蛋白酶等蛋白消化酶类，但能有效地使贴壁细胞与培养瓶皿表面脱离而达到分离细胞目的。其特点是:1、作用温和;2、对细胞的损伤和破坏极小，不影响细胞生物学特性，是肿瘤细胞的极好细胞脱壁方法;3、可以在血清存在的情况下进行消化。消化后的细胞可进行传代培养，亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、WesternBlot、免疫共沉淀等实验，通常室温下10min左右就可以消化下大多数贴壁细胞，该消化液适用于消化肿瘤、脑、肝、肾、肺组织等，尤其适用于上皮组织。
产品组成：
自备材料
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1.PBS、培养液
2.显微镜
3.离心机
操作步骤(仅供参考)/p>
1.贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌PBS、培养液洗涤细胞1次。
②加入少量Non-enzyCellDetachSolution，略盖过细胞即可(一般按细胞的有效体积的10倍添加)。
③室温放置10min，如置于37℃脱壁反应会加速，直到细胞完全脱壁，不同的细胞消化时间有所不同。亦可显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除消化液。
④加入细胞培养液或5倍体积PBS缓冲液终止反应。如果发现消化不足，则加入Non-enzyCellDetachSolution重新消化。
⑤0~g离心3~5min，沉淀细胞，弃上清，尽量去除Non-enzyCellDetachSolution，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2.组织的消化
①PBS、培养液清洗组织1次，用无菌的刮勺或茶匙将剪碎的组织碎片转移至合适容器。
②按组织有效体积的5~10倍，加入Non-enzyCellDetachSolution。
③置于37℃作用4~48h，无需振荡，不同的细胞消化时间有所不同。对于较难分解的肿瘤细胞，可作用5天或更长时间，但应重新用消化液悬浮。
④吹打组织碎片数次，释放松散的细胞，轻轻晃动培养瓶或皿，倒置显微镜下检查分离情况当细胞量少和/或在组织碎片中仍可见细胞时，需要继续消化。
⑤0~g离心3~5min，沉淀细胞，弃上清，尽量去除Non-enzyCellDetachSolution，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
注意事项/p>
1.尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
2.在使用细胞消化液的过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。
3.细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
