白癜风最新治疗办法 https://m-mip.39.net/fk/mipso_4249431.html一、实验目的
1.了解细胞增殖动力学的主要指标。
2.掌握细胞增殖动力学的检测方法。
3.掌握MTT法检测细胞增殖的工作原理。
二、实验原理
有丝分裂指数和生长曲线是细胞增殖动力学的主要指标。
有丝分裂指数是指处于分裂期的细胞数占细胞总数的百分比。
MTT法的原理是活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢(Zā)并沉淀在细胞中，而死细胞则无此功能。DMSO能溶解细胞中的甲臢(Zā)，用酶连检测仪在nm处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
三、试剂与器材
1.材料：LN人胶质瘤细胞系。
2.试剂：培养液（含10%胎牛血清）、MTT、DMSO、酒精等。
3.器材：二氧化碳培养箱、酶联检测仪、倒置显微镜、移液器、摇床、96孔板等。
四、实验方法
1.接种细胞。将细胞以1X10^5/孔接种至96孔板。
2.培养48h。
3.每孔加20ulMTT，培养箱中孵育4h。
4.弃去培养液，每孔加入ulDMSO，摇床震荡至出现蓝色。5.nm下于酶联检测仪上测定各孔吸光值。
五、注意事项
1.所有的操作都应该在超净工作台中酒精灯火焰的旁边进行。
酒精灯
2.设置对照。
3.最好设置处理。
