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李记生物细胞转染试剂常见问题一 [复制链接]

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01涉及产品

EZTransPlus细胞转染试剂(Ⅱ) 货号:AC04L

EZTrans细胞转染试剂(高效)
  货号:AC04L/AC04L

EZTrans细胞转染试剂(低毒)
  货号:AC04L/AC04L

02其他转染产品

EZTransPro细胞转染试剂(GMP) 货号:AC04L/AC04L/AC04L

EZTransRNA转染试剂
  
  
   货号:AC04L

03李记生物细胞转染试剂常见问题(一)

Q1:李记有3款转染试剂,这3款有什么区别?和Li**对比效果如何?

A1:我司自行测试与收集客户反馈数据,得到类似结论:


  效率方面:EZTransPlus>Li**≈EZTrans(高效)>Li**>EZTrans(低毒)


  毒性方面:EZTrans(低毒)≈Li**<EZTransPlus<EZTrans(高效)≈Li**

Q2:我们传的细胞有抗生素,抗生素是绝对会影响转染效率吗?

A2:能不加尽量不加,理论上抗生素进不到细胞内,但是在转染试剂的作用下,细胞的通透性增加,抗生素可能进到细胞内,对实验结果完成影响。

Q3:protocol提到,要用Opti-MEM稀释质粒和转染试剂。不能用稀释么?另外质粒和转染试剂为什么要先稀释然后再混合?不能把转染试剂直接加到质粒溶液中混合,然后再加培养基稀释么?

A3:EZTrans细胞转染液属于阳离子类型的转染试剂,它与DNA形成复合物需要一定的条件,在合适的浓度下,有利于阳离子包裹DNA形成良好形态的复合物进入细胞。


  如果直接把两者直接混合,两者容易很快形成聚合物,聚集相态多样,有可能使DNA暴露在表面,不容易进入细胞,进而降低转染效率。所以EZTrans和DNA的混合顺序也很重要。


  培养细胞大多会用到胎牛血清,血清成分复杂,没有人能说清成分及含量。细胞转染液成分比较明确,但是不能确定是会不会与胎牛血清的不知名成分结合,事实上这种现象在大多数转染试剂中都会造成不良影响,所以在形成EZTrans-DNA复合物过程中要避免血清的影响。

Q4:protocol提到,“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h,还是指加入复合物后转染24-48h?

A4:所有时间都是从EZTrans-DNA复合物与细胞接触开始算。

Q5:我就是问的体内直接转染小鼠。你们现有的protocol是体外实验的方法?

A5:体内直接转染目前最多的是腺病毒,慢病毒,腺相关病毒。转染试剂直接在体内用的报道我们目前没有听过。现有的做法是细胞在体外培养,转染筛选后再打入体内。

文中涉及的生物试剂产品都为上海李记生物科技有限公司提供,还有WB技术服务等竭诚为您服务

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