中科白癜风公认好口碑医院 https://jbk.39.net/yiyuanzaixian/bjzkbdfyy/一、基本背景：
Ｒeya等于年第1次提出肿瘤干细胞这一说法，认为在恶性肿瘤组织中存在一种数量极少、保留有干细胞特性的一类细胞，这类细胞被称为肿瘤干细胞，亦称作癌干细胞或肿瘤干细胞样细胞，它们具有自我更新、无限增殖以及多方向分化的能力，是肿瘤发生以及复发的原始细胞。
肿瘤干细胞理论认为，肿瘤干细胞是造成恶性肿瘤治疗失败最主要的原因，其不仅导致了肿瘤的发生，还具有形成不同分化表型子代肿瘤细胞的特性。
二、肿瘤干细胞分离技术现状：
肿瘤干细胞的分离方法目前主要有“流式分选法”、“3D培养法”、“无血清神经干细胞培养基培养法”。其中“流式分选法”依据表面标志物进行筛选，准确、快捷，但是经济成本极高；“3D培养法”更接近人体内环境，模拟性最好，但是实际操作难度较大，成功率较低，且不便纯化；“无血清神经干细胞培养基培养法”操作简单、经济成本低，但是时间成本很高、实际操作中适用范围有限。
三、技术创新：
我们在“无血清神经干细胞培养基培养法”的基础上做了改进，保留了其操作简单、经济成本低的优点，同时极大缩短了实验周期，拓展了该方法的适用范围，在传统方法失败的细胞株也中获得成功。
四、实验案例——现行诱导法：
现行诱导方法是一种“无血清神经干细胞培养基培养法”，此法选用低粘附性培养板进行细胞接种，再采用干性培养基（无血清基础培养基中1:50添加B27，并加入EGF20ng/ml、bFGF20ng/ml）诱导成球；成球后，将细胞吹散传代，并再次进行干性成球。待二次成球后，再次吹散，并使用该细胞悬液用于后续实验的实验方法（由于细胞干性成球有不确定性，并不能保证每种细胞一定能干性诱导成功）。
五、创新诱导法结果展示：
经过创新改良，我们就两种不同的方法进行了平行实验，得到了如下的结果。结果显示传统方法在难诱导的细胞面前表现“无力”，而我们的“创新诱导法”顺利取得成功。
我们在实践中发现，现行方法对于容易诱导的细胞系（如U）可以获得成功，但对于分化程度高、贴壁牢固的难诱导细胞系（如HEPG2、HCCLM3）则屡屡失败。经过我们的创新改进，顺利解决了这个问题，在其他癌细胞系（如HEP3B、HUH7等）也顺利获得成功，不仅适用范围扩大了，同时提高了稳定性，并且即便不使用低粘附培养板也可以获得成功，大大降低了时间、经济成本。
六、其它案例：
七、肿瘤细胞干性诱导实验应用范围——科学/医学/药学研究：
1）肿瘤干细胞靶向药物的研究；
2）基于肿瘤干细胞表面标志物给予目标性治疗，通过相对特异标志物杀死肿瘤干细胞的研究；
3）针对肿瘤干细胞主要信号通路治疗，使通路失效，导致下游靶基因、靶蛋白的合成受影响的研究；
4）针对肿瘤形成的微环境给予治疗，使微环境不适于肿瘤干细胞的生存，从而抑制其分裂、增殖、并分化成肿瘤干细胞，使其无法分化形成成熟的肿瘤细胞，进而增加对常规治疗手段的敏感性的研究；
5）利用肿瘤干细胞来源于正常组织干细胞的理论，对特定增殖的健康的干细胞施以适宜的靶向治疗，以降低其转变为肿瘤干细胞的概率的研究。
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