网站运营求职招聘微信群 https://www.edunews.net.cn/2021/ywbb_1008/144576.html原创作者:XiankunZhao
本文参考:ExPASyDatabase、ICLACDatabase、DSMZDatabase
导读
●BEL-、BEL-细胞株与上篇所述的SMMC-情况一样,也是70年代由国内实验室建系。最初的BEL-、BEL-,不仅帮助我们阐明了人肝癌细胞的生物学特性,也为肝癌治疗、其他相关研究提供了一个理想的肝癌实验模型。
(来源:ICLACDatabase)
●随着在国内实验室中广泛使用,由于交叉污染、标记错误等原因,致使BEL-、BEL-也被HELA污染(部分BEL-被HCT-8污染)。
来源
BEL-、BEL-于年由中国科学院上海细胞生物学研究所建立:年2月19日,BEL-医院一名53岁男性肝癌患者体内获得,同年7月19日,从一名69岁男性肝癌患者体内获得BEL-。两名患者术前AFP测定均为阳性,病理学诊断为原发性肝细胞癌。两株细胞株分别历时14、7天后,组织小块周围开始长出细胞,初期细胞形态均先是上皮样细胞,继有梭形细胞。第三代传代培养后,均每隔6-7天即可传代一次。
BEL-、BEL-细胞形态都是以多边形上皮样细胞占绝大多数(第三次传代以后);此外,两者的细胞异种接种长瘤率都非常高,细胞AFP测定均为阳性,乳酸脱氢酶(LDH)同工酶分析也符合临床人体肝癌的特征,即M型同功酶的酶活力低于H型。
被HELA污染
我们发现BEL-、BEL-被HELA污染,经历了与SMMC-一样的过程:年之前,SCI期刊未要求作者须提交细胞株鉴定报告,因此国内科研人员进行基础研究及文章投稿时,无鉴定细胞株的意识,这间接导致了被污染及实验室间的进一步扩散;年后,细胞株鉴定被SCI主流杂志、相关权威机构真正重视后,BEL-、BEL-相继被发现存在交叉污染的现象。有文献也显示:部分BEL-被HCT-8污染。
(来源:ExPASyDatabase)
还是年FangYe等人在FASEBJ.上的那篇文章,报道了BEL-细胞株已经被污染:个样本中有两株分别来源于不同实验室的BEL-,分型数据提示,一株与HELA的STR数据一致,另一株则与HCT-8一致。两年后,XiaocuiBian等人对国内株人源肿瘤细胞的交叉污染调查中,进一步验证了BEL-被HELA污染。同年,PLoSOne及JHepatol的两篇文章报道了BEL-被HELA污染(两篇文章也都揭示了BEL-被HELA污染)。ExPASy数据库对两株细胞株信息都作出明确提示:Problematiccellline:Contaminated,ShowntobeaHeLaderivative。在ICLAC的TheRegisterofCross-Contaminated/MisidentifiedCellLines中,两株细胞株也都被收录进去(RegistrationID分别为ICLAC-、ICLAC-)。
(来源:FangYeetal.,)(来源:YaqingHuangetal.,)
鉴达的BEL-、BEL-鉴定
截止目前,鉴达受理的BEL-、BEL-分别为16株、11株。与ExPASy、DSMZ数据库重新比对确认后,实际鉴定结果显示:BEL-有10株为HELA,1株为HepG2,4株为HCT-8,1株为NOTHumanOrigin;BEL-有9株为HELA,2株为HuH7。鉴达受理的BEL-、BEL-鉴定结果,同样验证了这两株细胞株被HELA、HCT-8污染的事实。
(来源:鉴达受理/鉴定结果)
结合文献报道、各数据库信息及鉴达鉴定结果,对于专注肝癌方面基础研究的实验室,鉴达同样不推荐使用BEL-、BEL-来开展相关实验!可使用HepG2、HuH7、SK-HEP-1、Hep3B等细胞株,购买渠道最好选择权威单位。鉴达建议,不管从任何单位购买,细胞株都应第一时间进行STR鉴定,以确认其身份。
参考文献:
1.陈瑞铭等,人体肝癌体外细胞株(BEL-)的建立及其特征,科学通报,09,。2.陈瑞铭等,体外培养三个人体肝癌细胞系的建立及其特征,中国科学,12,。3.FangYeetal.,Geneticprofilingrevealsanalarmingrateofcross-contaminationamonghumancelllinesusedinChina.FASEBJ.Oct;29(10):-72.4.BianXetal.,ACombinationofSpeciesIdentificationandSTRProfilingIdentifiesCross-contaminatedCellsfromHumanTumorCellLines.SciRep.Aug29;7(1):.5.HuangYetal.,InvestigationofCross-ContaminationandMisidentificationofWidelyUsedTumorCellLines.PLoSOne.Jan20;12(1):e.6.RebouissouSetal.,Noteofcaution:Contaminationsofhepatocellularcelllines.JHepatol.Nov;67(5):-.
苏州鉴达采用STR分型技术,针对人源细胞20个位点进行检测,型、XL型遗传分析仪进行毛细管电泳,与DSMZ、Cellosaurus、ATCC等数据库进行比对,出具权威英文报告,为全国近家科研机构(高校、研究所、医院、公司)提供高质量服务,多家单位已利用鉴达细胞株鉴定服务在高水平期刊(如ClinicalCancerResearch、NatureCommnications、IntJCancer等)发表论文。