Elabscience流式课堂细胞周期 [复制链接]

最近，有很多小伙伴跟我们抱怨说：学生物真是太难了！做了大半年的实验，CCK-8、周期、凋亡、ELISA……实验做了一大堆，结果一分析，数据全都对不上。

·处理后CCK-8检测显示，明显有抑制增殖的效果

·但是凋亡检测发现，处理后凋亡率反而下降了

·周期检测中各组更是没有任何变化

大家先别着急，真相往往隐藏在这看似“冲突”的实验结果中，也许你的结果没有任何问题。

本期流式课堂，我们来看看：

CCK-8与细胞周期结果之间的关系

要分析这两个实验结果的关系，我们首先得准确知道每个实验结果的真实含义。

有小伙伴可能就会说了，这还不简单嘛，CCK-8表示细胞增殖速度，细胞周期检测结果表示细胞周期中各时期的比例。对此，我只能说：对了，但不完全对。

准确来说，CCK-8检测的是样本中脱氢酶总活力，细胞周期检测的是每个细胞的核酸含量。

CCK-8检测原理示意图

▲周期检测原理示意图

只有从这个层面去看待我们的实验结果，才能找到问题的根本。

根据实验原理，我们可以得知，通过CCK-8检测到OD值发生了变化，可能是由以下原因造成：

同样地，细胞周期检测出现异常，也可以从实验原理中找到合理的解释。核酸所指的除了细胞核中的DNA外，还包含RNA等多种物质，这些物质都可以与PI结合，从而影响结果分析。

更多细胞周期检测异常情况分析及解决方案的相关知识，请查看咱们百家号账号内往期文章流式课堂｜细胞周期检测三大常见问题及解决方案

在分析CCK-8与周期关系之前，我们首先需要排除异常原因带来的结果变化。如：

1

样本中含有氧化还原剂/金属离子/有色药物等，在进行CCK-8检测前，应先进行换液；

2

在进行细胞周期检测时，应注意控制细胞接种密度，培养时细胞密度不可过大，避免细胞间产生接触抑制，从而大量停留在G0期；

3

在进行细胞周期检测时，需添加RNase，避免RNA对结果造成的影响。

完成以上工作后，我们就来看看CCK-8与细胞周期之间存在的变化关系，及其可能的原因：

以上内容是本篇给大家分享的流式干货全部内容。如有更多问题，请访问Elabscience官方网站进行查看~。