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HUVECHUVECC苏州鉴达细 [复制链接]

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原创作者:XiankunZhao

本文参考:ExPASyDatabase、ATCCDatabase、JCRBDatabase

导读

●由于能够参与血管形成、调节血管内外大分子和炎症细胞的交换、被激活时可以产生多种活性介质,血管内皮细胞(vascularendothelialcell,VEC)成为心血管、肿瘤、炎症、免疫、药理等多学科研究的靶点。作为经典的血管内皮细胞株,HUVEC的建立为VEC相关研究提供了理想模型。

(图片来源:STRprofileofHUVEC,JCRB)

●目前ExPASy、ATCC、JCRB均收录了HUVEC的标准STR数据,ExPASy与ICLAC未将其标注为问题细胞。但鉴达的鉴定结果显示,国内的HUVEC细胞株也已经出现被污染的情况。

来源

年,HUVEC细胞株由HiroyoshiHoshi、WallaceL.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。前期收集得到的细胞团块经MCDB培养基(含Bovinepituitaryextract、FBS)重悬后,接种于覆有胶原蛋白的60-mm培养皿中,细胞汇合后胰酶消化、收集细胞。之后接种于覆有胶原蛋白的T-75培养瓶中进行第二次培养,即为HUVEC细胞株第一代。细胞形态符合人类内皮细胞形态特征,细胞呈铺路石样;Ⅷ因子相关抗原染色鉴定结果为阳性。HUVEC细胞能够在半固体培养基上生长,形成菌落。细胞无致瘤性。

年,SetsukoShioda等人发现HUVEC细胞株(passage31)在贴壁汇合时细胞与细胞之间存在间隙,这与典型的内皮细胞特征有所不同。

(图片来源:HoshiandMcKeehan,)(图片来源:SetsukoShiodaetal.,)

SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍增时间为84个小时,32-34代的倍增时间为个小时。培养至40代后,细胞形态出现多样化,有些细胞变大或变小,有些细胞出现多核;细胞密度下降、倍增时间延长。最后细胞在第54代停止生长,ATCC的预期寿命也显示在50-60代。

更重要的发现是,HUVEC的HHV-6(Humanherpesvirus6)病*检测呈阳性,HHV-6基因组整合到了HUVEC的9号染色体长臂的远端。不过整合区域位于亚端粒,HHV-6基因组只有一个拷贝数,因此对HUVEC细胞增殖及端粒功能未产生影响。

(图片来源:SetsukoShiodaetal.,)

SetsukoShioda等人对细胞株进行STR分型,其结果与数据库中HUVEC标准数据一致,不过D13S位点会出现轻微突变——偶尔出现单个等位基因缺失的现象。

鉴达的HUVEC鉴定

与NCM-情况类似,目前HUVEC细胞株在Cellosaurus、ICLAC中未被标注、登记为问题细胞。但鉴达的HUVEC鉴定结果显示,国内可能已经不存在真正来源于Hoshi、McKeehan建立的HUVEC细胞株。

截止目前,鉴达受理HUVEC细胞株鉴定共计22株。与ExPASy、DSMZ等数据库重新比对确认后,实际鉴定结果显示:有14株为T-24,4株为无匹配结果,2株为三种未知细胞的交叉污染(多个位点同时出现了4-6个等位基因),1株为EA.hy,1株为非人源细胞株。

(图片来源:鉴达的HUVEC鉴定结果统计)(图片来源:鉴达的HUVEC鉴定报告)

因此鉴达建议,国内HUVEC细胞株最好停止使用。如果从国外细胞供应商购买,也应及时进行STR鉴定,以确认其身份。

参考文献:

1.HiroyoshiHoshi,WallaceL.Mckeehan,Brain-andlivercell-derivedfactorsarerequiredforgrowthofhumanendothelialcellsinserum-freeculture.ProcNatlAcadSciUSA.Oct;81(20):-7.

2.SetsukoShiodaetal.,ThehumanvascularendothelialcelllineHUV-EC-CharborstheintegratedHHV-6Bgenomewhichremainsstableinlongtermculture.Cytotechnology.Feb;70(1):-.

苏州鉴达采用STR分型技术,针对人源细胞20个位点进行检测,XL型遗传分析仪进行毛细管电泳,与DSMZ、Cellosaurus、ATCC等数据库进行比对,出具权威英文报告,为全国近家科研机构(高校、研究所、医院、公司)提供高质量服务,多家单位已利用鉴达细胞株鉴定服务在高水平期刊(如ClinicalCancerResearch、NatureCommnications、IntJCancer等)发表论文。

标注优惠*策:如客户在发表的高水平SCI论文(IF8)中标注细胞株鉴定由我公司完成,我们承诺为客户免费检测两株细胞株。格式如下:ThecelllineswerecharacterizedbyGeneticTestingBiotechnologyCorporation(Suzhou,China)usingshorttandemrepeat(STR)markers.

SelectedpublicationswithImpactFactor5.0usingourcelllineauthenticationservice

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