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在细胞培养实验室中，支原体污染是一种普遍存在的现象，支原体的污染肉眼不易察觉，直到严重的阶段才会出现培养基变色、细胞异常等情况。支原体可造成细胞代谢改变，基因表达谱发生变化，从而严重干扰实验进程。
细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(Morale)、精氨酸支原体(Marginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和菜氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。
支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染、培养基的污染、被污染细胞造成的交叉污染、实验器材的污染、制备细胞的原始组织或器官的污染，等等。
休外生长的细胞对微生物及一些有害有*物质没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染(如细菌、真菌、支原体、病*等)、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染(如抗体、补体)。对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。
细胞培养避免支原体污染的方法要从多方面避免支原体的污染
（1）严格操作要求：工作开始要先用75%酒精消*手部以及袖口、瓶口等；在进行多种细胞培养操作时，所用器具（如移液枪等）要严格区分；在进行换液或传代操作时，注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口，以免把细菌带到培养液中污染其他细胞。细胞培养实验室应制定严格的管理制度，按照规范的实验程序操作。
（2）保证细胞培养基和器材无菌，器材一般都经过辐射处理，基本可以保证无菌，商业化CD培养基一般也能保证无菌。如实验室有发现支原体感染，已经开启的培养基不宜继续使用。
（3）在培养基中加入适量抗生素：对支原体比较有效的抗生素为四环素类和大环内酯类，如卡那霉素50μg/ml，一些氟喹诺酮也有抑制支原体生长的作用
从可靠来源引进、使用细胞:特别是知名的信誉良好的专门机构,如ATCC、基础医学细胞中心等,这些机构对细胞质量进行一系列检测。细胞一旦购置或从别处引入，均应及早留种冻存，一旦发生污染可重新复苏培养。建立良好的种子库管理规章制度，并定期对实验室中的培养物进行支原体检测。
