浅谈细胞免疫治疗CART1 [复制链接]

CAR-T和抗体药物一样，是肿瘤免疫疗法的一种，被认为是目前肿瘤治疗领域最具有发展潜力的治疗技术，被广大临床工作者和肿瘤患者寄予了厚望，具有巨大的临床转化价值。

什么是CAR-T细胞

CAR-T细胞疗法（ChimericAntigenReceptorT-Cellimmunotherapy）：全称嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，通过向T细胞中导入一种人工设计的CAR分子，赋予T细胞全新的靶向活化功能，再将这种改造后的CAR-T细胞回输到患者体内，这些CAR-T不再具有MHC限制性，只通过结合靶向抗原即可被活化，从而高效杀伤肿瘤细胞。CAR-T的关键是CAR分子的设计，CAR是一种的人工改造的受体分子，它可以赋予免疫细胞被某个特定靶点激活的特异性，从而增强细胞识别抗原信号与活化的功能。

传统的免疫细胞疗法，是将人体自身的免疫细胞进行体外培养，并回输体内以期望实现对肿瘤细胞的杀灭。但传统的以CIK为主的免疫细胞治疗因缺乏靶向性而疗效堪忧，如何增加免疫细胞对肿瘤的识别能力是提升免疫细胞对肿瘤杀伤能力的关键。幸运的是，大多数的肿瘤细胞均表达某些肿瘤特异性或相关性抗原（TSA或者TAA），人们将可以识别这些肿瘤抗原的抗体的“抗原识别区（scFv）”和可以促进T细胞增殖的原件偶联在一起，通过基因转导的方法转染患者的T细胞，使其表达嵌合抗原受体(CAR)。患者的T细胞被“重编码”后，在与靶细胞接触后可生成大量肿瘤特异性的CAR-T细胞，并实现对肿瘤细胞的特异性杀伤。

CAR-T细胞疗法技术流程

第一步:构建靶向肿瘤细胞相关表面抗原的CAR分子

第二步:从患者外周血单个核细胞（PBMC）中分选纯化出T细胞

第三步:采用电穿孔、包病*等方式将提前设计好的CAR分子导入T细胞中

第四步:筛选成功导入CAR分子的CAR-T细胞，并在体外刺激其扩增

第五步:将扩增好的CAR-T细胞回输到患者体内

第六步:严密监护病人，尤其是控制前几天身体的剧烈反应

CAR-T疗法潜在优势和劣势

杀瘤效果好：

CAR分子是人工设计的受体，能够根据目标靶点优化受体结构，CAR-T细胞只需要和靶点分子结合即可被激活，从而杀伤靶细胞。不受MHC分子，共刺激分子的影响。

治疗效果持久：

CAR-T细胞进入体内后能够在患者体内增殖活化，可长期在体内存活，治疗效果持久，患者输入一次CAR-T细胞，治疗效果可维持数年。患者无需反复注射抗体类药物或化疗。

高龄人群适用：

由于老年患者耐受性较低，传统疗法只能使用次优剂量，疗效受影响，而所有年龄人群对CAR-T疗法有良好的耐受。

适宜联合用药：

CAR-T可以和抗体类药物以及化疗药物搭配使用达到1+12的治疗效果，而不会额外增加*副作用

实体瘤效果差：

CAR-T细胞输入患者体内，容易被阻滞在实体瘤外，不易进入到肿瘤内部，对实体瘤的杀伤效果有限。

脱靶效应：

CAR-T靶向肿瘤相关抗原，并非肿瘤细胞特异性的，正常细胞也可能受到攻击

可及性差：

CAR-T制备流程需2-3周晚期患者“等不起”，部分患者体质不允许获得足够多健康的T细胞，不同患者最终获得的CAR-T细胞的质量不同

稳定性差：

引入的CAR受体为外源性分子，具有一定的免疫原性，机体会产生针对CAR的抗抗体，会影响CAR-T细胞的存活。此外CAR分子使用的scFV不稳定，容易发生自身聚集，引发CRS。

CAR-T大致可以分为五代，不能笼统认为后代一定比前代强，需等待临床验证

CAR细胞的结构：

CAR分子的组成：负责抗原识别的胞外区域、跨膜区域、胞内信号传递区域。

胞外区域：表达于细胞表面的抗原识别区域。该抗原识别域是一个单链片段变体(scFV)，主要由抗原特异性免疫球蛋白的可变轻链和重链区域组成，通过间隔区连接到跨膜结构域，负责识别抗原接收信号。

跨膜结构域：通常是横跨细胞膜的疏水α螺旋，是受体表面表达和稳定的基础。

胞内区域：是受体的功能段，最基本的组成部分是CD3ζ，有些CAR分子的细胞内区域还包含多个共刺激分子,它们合力负责将细胞活化和增殖信号传导到细胞内。

CAR-T技术发展史

T细胞的作用机制：

肿瘤抗原被抗原呈递细胞（APC）吞噬并降解成小肽；部分小肽与组织相容性复合体（MHC分子）相互结合呈递在APC的膜表面；T细胞的TCR经重排后形成各种不同的细胞，当某种T细胞的TCR刚好能和呈递在APC细胞表面的MHC-抗原复合体结合后，在共刺激受体/配体(如B7-CD28)的共同作用下，T细胞获得了激活和增殖；而激活的T细胞由于携带识别肿瘤抗原的TCR就能通过识别肿瘤细胞表面的肿瘤抗原杀死肿瘤细胞。

TCR与抗体结构对比：

TCR属于免疫球蛋白家族，是由α链和β链通过二硫键形成异二聚体。它的胞外区结构与抗体的Fab段高度相似。不同的是抗体通过可变区直接与抗原结合，而TCR的可变区只能结合与MHC形成复合体的抗原。这种结合的差别是由于二者可变区的不同导致的。

基于此，科学家考虑将TCR的可变区替换成抗体的可变区（即构建抗体可变区与TCR恒定区的嵌合受体）以达到，无视MHC限制性而直接识别特定抗原的目的。