M1和M2型巨噬细胞流式染色实例 [复制链接]

江苏省免疫学会年第二次学术互换会议于11月21日在徐州告成召开。会议上，南京医科大学的杨硕讲解汇报了E3泛素连合酶Pellino3经过抵御TRAF6介导的泛素化和HIF1a的不变来负向调动巨噬细胞向M1极化以及IL-1β的形成，终究低落胰岛素抵当，禁止糖尿发病生的协商成就[1]。值得留心的是，nature杂志近来发文证实了去除Treg细胞后可禁止朽迈干系的肥胖、胰岛素抵当以及糖尿病的产生进展[2]。是以，慢性炎症在不同因为引发的二型糖尿病中的效用也或许是不同样。

真相上，巨噬细胞极化还可参加肿瘤、熏染性疾病以及布局的损伤和修理等生理病理流程。巨噬细胞在不同的微处境中可分裂为M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞[3].M1型巨噬细胞表白MHCII、CD80、CD86和CD16/32，渗出TNF-a、IL-6和IL-12等促炎因子，以及CXCL9、CXCL10和CXCL11等趋化因子[4,5]。此外，M2型巨噬细胞高表白arginase-1(Arg1)和CD，渗出抗炎因子IL-10以及CCL2、CCL17和CCL22等趋化因子[4-7]。

参考文件：

1.YangS,WangB,HumphriesF,HoganAE,OSheaD,MoynaghPN.TheE3ubiquitinligasePellino3protectsagainstobesity-inducedinflammationandinsulinresistance.Immunity;41:-87.

2.BapatSP,MyoungSuhJ,FangS,etal.Depletionoffat-residentTcellspreventsage-associatedinsulinresistance.Nature.

3.LawrenceT,NatoliG.Transcriptionalregulationofmacrophagepolarization:enablingdiversitywithidentity.NatRevImmunol;11:-61.

4.SatohT,TakeuchiO,VandenbonA,etal.TheJmjd3-Irf4axisregulatesM2macrophagepolarizationandhostresponsesagainsthelminthinfection.NatImmunol;11:-44.

5.SicaA,MantovaniA.Macrophageplasticityandpolarization:invivoveritas.JClinInvest;:-95.

6.MantovaniA,BiswasSK,GaldieroMR,SicaA,LocatiM.Macrophageplasticityandpolarizationintissuerepairandremodelling.JPathol;:-85.

7.MartinezFO,HelmingL,GordonS.Alternativeactivationofmacrophages:animmunologicfunctionalperspective.AnnuRevImmunol;27:-83.

腹腔中M1和M2型巨噬细胞流式染色实例

Mouse(腹腔贴壁细胞):M1和M2型巨噬细胞

1.标识物：M1:F4/80+CD11b+CD16/32+cells;M2:F4/80+CD11b+CD+cells;

2.流式细胞仪：BDFACSCalibur；

3.流式抗体及用量：CD16/32-PE(0.μL/test;12-;eBioscience);CD-PE(10μL/test;ABTU01;RD);CD11b-APC(0.μL/test;17-;eBioscience);F4/80-FITC(1μL/test;11-;eBioscience)；

4.染色前提：首先Fcblock孵育(1μL/test;14-;eBioscience),4℃,15min;接着F4/80、CD11b、CD16/32或CD表面染色,4℃,30min;

5.剖析软件：Flowjo(10.0.7);

6.圈门战略及染色见上图).

7.巨噬细胞M1及M2极化是一个机能学的界说，是以，除了M1、M2表面分子染色外，还务必聚集M1及M2细胞渗出的细胞因子以及趋化因子配合来差别M1、M2细胞。

8.不同布局中的巨噬细胞的表型也不断不同，请回答“macrophage”参考响应的流式染色圈门战略。

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