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细胞生物学实验细胞计数及细胞活力测定 [复制链接]

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细胞生物学实验系列——细胞计数

1.制备血细胞悬液

2.熟悉血细胞计数板

①取一洁净的细胞计数板,观察其外部形态;

计数板由长7.5cm,宽3.5cm玻璃制成,中间有两个计数室。

②用95%乙醇及擦镜纸擦净细胞计数室,放于低倍显微镜下观察。每个计数各分为9个大正方格,每个大格边长为1mm,计数室的底与盖玻片之间的距离0.1mm,即每大格的容积为1mmx1mmx0.1mm=0.1mm3。

四角的每个大格被分为16个小格;此四大方格常用于白细胞及体外培养细胞计数。

中央的大格被分为25个小格,中央的每个小格又被分为16个小格,此小格用于红细胞及血小板计数。

3.滴片

每人取1个血细胞计数板及1张盖玻片,用擦镜纸将盖玻片擦干净,把盖玻片盖在血细胞计数板槽上,然后用吸管将制备好的细胞悬液混匀,吸取血细胞悬液、滴1滴于血细胞计数板的盖玻片一侧边缘,使细胞悬液自然流入计数室内。

注意血细胞悬液不可滴得过多,如溢出或盖玻片内有气泡必须重做,否则将影响计数结果。

4.计数

在低倍镜下数出计数板上计数室四角四大格中的细胞数。

如果有细胞压线,注意数上不数下,数左不数右。

5.细胞浓度计算

将四大格的细胞总数除以4,得出平均每大格的细胞数,每大格的容积

为0.1mm3,乘以即为mm3(1ml),因此,不同稀释倍数细胞悬液的细胞浓度可用公式计算:

细胞浓度(细胞数/ml)=(四大格的细胞数/4)xx稀释倍数

细胞活力=(四大格的细胞总数-染色的细胞数)/细胞总数×%

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