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细胞焦亡研究怎么做 [复制链接]

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伯远医学是武汉伯远生物科技有限公司旗下全新开展的医学服务平台。伯远生物成立于年7月26日,位于东湖高新技术开发区光谷生物城武汉生物技术研究院B8栋。伯远生物专注于前沿分子生物学技术在生命科学研究和人类健康领域的应用和创新,致力于成为全球领先的基因科技产品和服务提供者。细胞焦亡(Pyroptosis)又称细胞炎性坏死,是近年来发现并证实的一种新型程序性细胞死亡,其依赖于炎性半胱天冬酶(包括caspase-1/4/5/11),通过切割Gasdermin-D(GSDMD)蛋白而诱发,GSDMD被切割后,释放出N端结构域,该结构域具有结合膜脂并在细胞膜上打孔的活性,导致细胞渗透压发生变化,表现为细胞不断胀大直至细胞膜破裂,导致细胞内容物释放,伴有大量促炎症因子的释放。

背景说明

细胞焦亡的机制中GSDMD的切割,IL-1β和IL-18前体的切割成熟和释放是关键信号,因此证明所诱发的细胞死亡方式是否为细胞焦亡,一般需进行以下实验:

(1)GSDMD的切割(可采用Westernblot、免疫荧光染色等方式检测);

(2)通路相关基因检测(可采用RT-PCR、Westernblot等方式检测);

(3)炎症因子水平检测(可采用Westernblot、ELISA等方式检测);

(4)细胞形态学与细胞活力检测(可采用电镜观察细胞形态、CCK-8等方式检测);

(5)染色质完整性检测(TUNEL等);

(6)可选免疫组化检测组织蛋白的表达。

图细胞焦亡调控机制(Frank,etal.)

服务流程

服务流程

客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养——焦亡检测——结果分析——出具实验报告——结果交付

服务内容及说明

服务内容及说明

适用范围

细胞焦亡是机体重要的免疫反应,广泛参与肿瘤、感染性疾病、神经系统相关疾病、代谢性疾病和动脉粥样硬化性疾病等的发生发展,在拮抗感染和内源性危险信号中发挥重要作用。对细胞焦亡的深入研究有助于认识其在相关疾病发生发展和转归中的作用,为临床防治提供新思路。

客户下单及项目信息填写

请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:

1、细胞类型与名称;

2、细胞处理方式及实验条件参数设置;

3、尽可能丰富的相关资料、文献。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付内容

1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);

2、鉴定报告与结果分析;

3、详细实验报告。

文献示例

文献示例

图以各种方式检测细胞焦亡(Caoetal.,)。A光学显微镜观察细胞形态,红色箭头表示由于焦亡而破裂的细胞。B免疫荧光分析GSDMD-NT蛋白水平。C、DPI阳性死细胞计数。E、F细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)及IL-1β含量。

参考文献

FrankD,VinceJE.Pyroptosisversusnecroptosis:similarities,differences,andcrosstalk.CellDeathDiffer.;26(1):99-.

CaoJ,LiL,YaoY,etal.Dehydroepiandrosteroneexacerbatesnigericin-inducedabnormalautophagyandpyroptosisviaGPERactivationinLPS-primedmacrophages.CellDeathDis.;13(4):.

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