NK细胞能直接杀伤某些肿瘤细胞、病*感染靶细胞，在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。NK细胞的杀伤活性测定常用4h51Cr释放法和3H－TdR释放法。通过将同位素51Cr或3H－TdR掺入到NK杀伤的靶细胞K（红白细胞、白血病细胞），按一定细胞比例与效应细胞（NK）孵育，根据细胞上清中靶细胞被杀伤后所释放的51Cr或3H－TdR水平计算出杀伤细胞的杀伤活性。将待检细胞*性的NK细胞与标记的靶细胞混合（比例约为50∶1或∶1），靶细胞被杀伤越多，释放到上清液中的游离的51Cr或3H－TdR越多。用γ射线测量仪或β液闪仪检测上清液中的cpm值，即可计算出待检细胞杀伤活性的高低。
1.K细胞株、10％FBSRPMI、1％TritonX－、重组人IL－2、胰蛋白酶和DNA酶、3H－TdR、51Cr。
2.培养瓶、培养板、CO2孵箱、β液闪仪、γ射线测量仪等。
1.效应细胞的制备：NK功能效应细胞可取静止的PBMC，或经不同细胞因子诱导的PBMC。
2.杀伤试验：主要有4h51Cr释放法和3H－TdR释放法，前者要求51Cr质量好，同位素半衰期较短，操作所需时间短；后者需要无菌操作，所需时间较长。
3.4h51Cr释放法
（1）收获处于对数生长期的靶细胞K，洗涤后调整细胞浓度为2×／ml，取1×细胞0.5ml，加NaCrO4μci，37℃孵育2～3h，每15min轻轻振摇一次。
（2）用10％FCSRPMI溶液洗涤3次，每次r／min离心5min。重悬靶细胞浓度为1×／ml。
（3）96孔V型或U型培养板中，每孔加入靶细胞（浓度1×／ml）μl（1×细胞），每份3个复孔，每孔再加入μl不同细胞浓度的效应细胞（每次实验最好取3～4个不同的效应细胞／靶细胞比例，常用效靶比例为∶1，50∶1，25∶1，12.5∶1），最大释放组加入μl1％TritonX－；自然释放组加μl完全培养基，置37℃CO2孵箱中培养4h。
（4）每孔取出μl上清，γ射线测量仪上测定cpm值。
4.3H－TdR释放法
（1）收获处于对数生长期的靶细胞K洗涤后，重悬靶细胞浓度为2×／ml，加3HTdR20μci，37℃孵育2～3h。
（2）用10％FCSRPMI洗涤3次，每次r／min离心5min。调整靶细胞浓度为1×／ml。
（3）在96孔平底培养板中，每孔加入靶细胞（浓度1×／ml）μl（1×细胞），每份3个复孔。每孔再加入μl不同细胞浓度的效应细胞，最大释放组加μl1％TritonX－，自然释放组加μl完全培养基，置37℃、CO2孵箱培养18～24h。
（4）每孔吸出μl上清液，加入胰蛋白酶（终浓度0.15％）和DNA酶（终浓度为0.％），继续孵育30min。
（5）用细胞收集仪收获于玻璃纤维纸上，干燥后，移入液闪瓶中，加入1ml闪烁液，在β液闪仪中测cpm值。
1.4h51Cr释放法：γ射线测量仪上测定cpm值，计算特异性杀伤率（％），计算公式为
2.3H－TdR释放法：β液闪仪中测cpm值，计算特异性释放率（％），计算公式为