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TUhjnbcbe - 2023/7/17 21:31:00
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BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞是一种人类胰腺腺癌细胞系,是由一名50岁的男性患者的原位胰腺腺癌组织分离得到的。该细胞系于年由美国国立癌症研究所(NCI)的J.Fogh等人建立。

细胞信息

这些细胞不表达囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)。

种属:人

组织:胰腺

疾病:腺癌

形态学:上皮

生长方式:贴壁

培养条件:5%空气,5%二氧化碳;37℃

BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞系的培养方法步骤

1.培养基的配制

BxPC-3细胞系的培养基需要配制和准备好。常用的培养基包括DMEM(DulbeccosModifiedEaglesMedium)和RPMI(RoswellParkMemorialInstitute)培养基。在培养基中加入10%的胎牛血清(FBS)和1%的青霉素/链霉素(penicillin/streptomycin)混合抗生素,混合均匀后可以用于培养BxPC-3细胞。

胎牛血清

2.细胞的解冻

BxPC-3细胞可以从冷冻存储的细胞库中解冻。将冻存管放在37℃的水浴中,快速将管子中的细胞解冻。添加预先配置好的培养基到细胞中,轻轻混合细胞和培养基,将混合物转移至预先消*的离心管中。将细胞离心10分钟,去除上清液,再次加入预先配置好的培养基,将细胞转移至预先消*的培养皿中。

3.细胞的培养

将培养皿放置在37℃的恒温培养箱中,保持5%的CO2气氛和适当的湿度。每隔1-2天更换一次新的培养基,以促进细胞的生长和增殖。注意不要在细胞培养期间将细胞暴露在空气中,以防细胞受到氧化损伤。

4.细胞的传代

当细胞密度达到80-90%时,需要进行细胞的传代。将培养皿中的细胞用1XPBS洗涤一次,加入0.25%的胰蛋白酶(trypsin)溶液,将细胞在37℃的恒温箱中消化5-10分钟,将胰蛋白酶溶液去除,加入新的培养基,轻轻混合细胞和培养基,将混合物转移至新的培养皿中。注意在传代时不要过度消化细胞,以免影响细胞的生长和增殖。

5.细胞的冻存

在细胞的生长和增殖期间,需要定期将细胞进行冻存。将BxPC-3细胞中的培养基去除,加入10%的DMSO(dimethylsulfoxide)和90%的FBS混合液,缓慢混合细胞和混合液,将混合物转移至预先消*的冻存管中。将冻存管放置在-80℃的冰箱中,长期保存。

总之,以上是BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞系的培养方法步骤,需要注意细胞培养的条件和细胞的传代和冻存等操作。在使用BxPC-3细胞系进行实验之前,需要进行细胞的验证和鉴定,以保证实验结果的准确性和可靠性。

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