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TUhjnbcbe - 2023/7/25 22:17:00
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一.背景信息:

Maskin是在非洲爪蟾卵母细胞和胚胎中发现的酸性转化盘管(TACC)结构域蛋白的成员;它涉及到纺锤体的协调,并已被报道能介导细胞周期蛋白B1mRNA的翻译抑制。

二.结果:

maskinmRNA在4期卵母细胞的起始阶段被翻译抑制,在6期卵母细胞能被激活。maskinmRNA的翻译抑制与4期卵母细胞短聚(a)尾的存在相关。maskin的3UTR可以将转译调控传递给报告基因mRNA,人TACC3的3UTR也可以传递给报告基因mRNA。保守的GUCU重复元件在4期和6期卵母细胞中均有抑制翻译的作用,但该元件的缺失并不能消除对4期卵母细胞的抑制作用。UV交联实验表明,重叠的蛋白可以有效地结合到maskin和cyclinB13’UTRs上。如前所述,CPEB与cyclinB13UTR结合,但其与maskin3UTR的结合极少。通过RNA亲和层析和质谱分析,鉴定出胚胎死亡酰化元件结合蛋白(EDEN-BP)是同时与maskin和cyclinB13’UTRs结合的蛋白之一。

结论:

MaskinmRNA至少受两个阻遏因子和一个激活因子的翻译调控。进化上保守的GUCU重复序列是抗逆性元件之一。EDEN-BP同时与maskin和cyclinB13’UTRs结合,表明它可能参与了这些mRNAs的死亡磷酸化。

三.具体过程:

为了研究Maskin在卵发生过程中对cyclinB1的翻译抑制作用,我们对不同阶段的卵母细胞进行了western和northernblot检测(Dumont,)。从图1可以看出,cyclinB1mRNA在2期以后表达量最高,而蛋白在6期表达量较弱,在成熟的卵母细胞中表达量最高,说明cyclinB1mRNA在早期卵母细胞中被翻译抑制。maskinmRNA在2期以后也有类似的表达,而蛋白在6期以后表达量最大(在其他卵母细胞批次中)

四,实验证明

证明了maskinmRNA在早期4期卵母细胞中被其3UTR转录抑制。maskinmRNA的翻译激活与其poly(A)尾巴的延伸相一致。3’UTR中元素的映射发现,它包含两个抑制元素,其中一个是保守的GUCU重复序列。由于GUCU单独重复仍然抑制6期卵母细胞的翻译,maskin3UTR的其他序列必须介导翻译激活。紫外交联实验表明,具有相似组成的蛋白复合物与细胞周期蛋白的是EDEN-BP。

文章来源:每日生物评论

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