bEnd.3细胞是一种常用的小鼠脑毛细血管内皮细胞系，用于研究血脑屏障的相关问题。以下是bEnd.3细胞培养实验的一般步骤：
1.培养基的制备：将DMEM培养基中加入10%的胎牛血清（FBS）、1%的L-谷氨酸、U/mL的青霉素和μg/mL的链霉素。将混合液过滤灭菌后即可使用。
2.细胞的预处理：将bEnd.3细胞解冻后，将细胞转移到含有10%FBS的培养基中，放入37℃的恒温培养箱中培养。细胞密度需要视具体实验而定，一般在细胞密度达到70%～80%时进行下一步操作。
3.细胞的传代：将细胞用1XPBS洗涤，加入胰酶-EDTA溶液（0.25%胰酶-EDTA），放入37℃恒温培养箱中消化10分钟，加入等体积的培养基中停止消化，轻轻振动离心管使细胞均匀分散，将细胞转移到新的含有10%FBS的培养基中，放入恒温培养箱中培养。一般每隔2~3天需要更换一次培养基。
4.细胞的处理：将bEnd.3细胞转移到自己需要的实验培养基中进行处理。例如，可以加入药物、病*等处理方式，处理时间和药物浓度需要根据实验需求而定。在处理过程中需要控制好细胞的密度，以免过度生长和细胞坏死。
5.细胞的收集：处理结束后，将培养基与药物等处理液全部吸出，用1XPBS洗涤细胞3次，加入胰酶-EDTA溶液消化10分钟，停止消化后加入等体积的培养基中，轻轻振动离心管使细胞均匀分散，离心培养瓶，将上清液吸出，加入1XPBS洗涤细胞3次，用适量的细胞培养基重新悬浮细胞。
6.细胞的计数和分装：用细胞计数板对细胞进行计数，根据具体实验需求将细胞分装到不同的离心管或培养皿中。
7.实验操作：根据具体实验需求进行实验操作，例如Westernblot、免疫荧光染色、细胞增殖分析等。
8.实验结果的记录和分析：记录实验操作过程中的各项参数和结果，进行数据处理和分析。
需要注意的是，在bEnd.3细胞培养实验过程中，需要注意细胞的密度、培养基的更换、细胞的传代等细节问题，以保证实验结果的准确性和可重复性。同时，需要遵守实验室的相关规定和安全操作规程，以确保实验过程中的安全性。