售前及发货中出现的问题与解答：
1.发货前，我方销售人员会提醒您，查看细胞说明书，了解培养条件与前提准备。
特殊细胞会提醒您需要的培养条件，比如：
LNCAP细胞：需凝胶包被
L15培养基：需%空气
内皮细胞系列：需专用培养基
Hepal-6细胞：需低碳酸氢钠(1.5g/L)DMEM，正常为3.7g/L
SF9细胞：需28℃，%空气培养
等等细胞培养
关于细胞培养中出现的问题与解答：
1.细胞培养要点-无菌
细胞培养需要严格的无菌环境及操作，试剂、耗材、操作等应严格参照无菌标准执行。耗材建议使用一次性用具，试剂需按照说明正确使用及保存。
2.细胞培养要点-培养条件
丰晖库内细胞都是经过实验充分验证的最佳培养条件，收到货请按照说明书条件培养和操作，使用优质的培养基和血清培养。个别特殊细胞需要添加细胞生长因子，建议购买专用培养基使用。（自行更改培养条件的将不保证培养结果）
常见基础培养基种类：、DMEM、DMEM/F12、MEM、α-MEM、F-12、F12K、L-15等，非特殊说明不得更换培养条件。
DMEM：无特殊说明均为高糖版DMEM，部分要求为低碳版1.5g/LNAHCO3。
L-15：需无CO2培养
3.细胞培养要点-复苏
冻存细胞从冰箱/液氮中取出后马上解冻（勿在室温停留），需在37℃水浴锅内快速融化，时间1-2min，保持瓶盖缝隙处于水浴液面上，避免污染。细胞融化后加入4-5ml提前温浴的新鲜培养基，0rpm离心4-5min(去除有*性的DMSO)，弃上清后轻柔吹散细胞，转移至6cm皿或T25瓶，添加适量培养基，置于培养箱培养。
示意图
4.细胞培养要点-传代
取处于对数生长期的细胞进行传代培养，细胞密度达80%即可传代，接种不均匀、局部密度过高会影响细胞状态，建议先传代处理。参考说明书选择合适的传递比例，传代密度过低可导致细胞增殖减慢。
皿：6cm→10cm
瓶：T25→T75
约为1:3的传代比例
5.细胞培养要点-消化
消化前使用PBS润洗细胞，一般使用0.25%胰酶(含有0.02%EDTA)，消化细胞时间2min左右，避免消化过度。可镜下观察，至细胞体积缩小，间隙变宽，用枪轻吹细胞可以脱壁时，添加含有血清的培养基停止消化，不要敲击瓶身使细胞脱落。较难消化的细胞可置于37℃培养箱消化，延长消化时间，于镜下观察确认消化状态。
*特殊细胞如RAW.7建议使用细胞刮刀消化
不同品牌试剂消化时间会有差异，因此不推荐固定的消化时间。
6.细胞培养要点-换液
一般建议2-3天换液，细胞生长需要稳定的培养环境，营养充足的情况下无需每天换液，密度低的情况可3-4天换液。培养基颜色变*提示细胞代谢量大，营养不足需及时换液。
*悬浮细胞如THP-1密度低时可直接添加新鲜培养基/血清维持培养。
*复苏后细胞密度低的换液情况，同上。
7.细胞培养要点-冻存
冻存液：按照细胞说明书标注的试剂浓度配置细胞冻存液，无血清冻存液参考各品牌说明书使用。
冻存方法：细胞冻存采用梯度缓慢降温法（4℃:0.5-1h→-20℃:2-4h→-80℃:过夜→液氮），或使用程序降温盒，使用前降温盒需保存于室温，将冻存细胞放入降温盒内，盖好盖子，置于-80℃过夜后，转移至液氮保存。
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期待您的