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TUhjnbcbe - 2023/11/24 7:06:00
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细胞计数作为医学检验的常用手段之一,也是细胞学平台的一个基本技能。虽然现在技术人员已经开发出高科技的仪器设备,但是大部分智能化的计数仪器所采用的基本原理还是与传统手工计数法一样。

并且,仪器只对“标本”本身负责,但上仪器之前的所有细胞处理过程,都需要咱们亲历亲为的。因此,对于刚进入细胞学领域的新人来说,学会细胞手工计数这一技能,还是非常有必要的。

今天给大家分享一下细胞手工计数的基本原理和需要注意的几点操作细节。

一、血球计数板结构

了解了计数室的体积,咱们还需要了解计数室的刻度规格。一般一个计数室会被分为个小方格,有两个划分形式:(1)25x16,一个计数室划分为25个中方格,每个中方格再划分为16个小方格;(2)16x25,一个计数室划分为16个中方格,每个中方格划分为25个小方格。因此,不管哪种规格,小方格的面积均为1/mm2。

接下来就是数数了。以上图血球计数板为例,该计数板左边三个参数:规格为XB-K-25,表示计数室有25个中方格,0.1mm代表计数室高度,1/mm2代表一个小方格面积。

针对红细胞和血小板的计数,通常我们会选取上图所示5个中方格(红色方格区域)内的细胞进行统计,随后取其平均数,再乘以25,即可得到计数室细胞总个数(如果不嫌麻烦直接把计数室细胞全部数完也可以哈~~),再乘以即可算出每毫升样本中的细胞数量。

针对白细胞及胰酶消化后的贴壁细胞和悬浮细胞的计数,通常我们会选取上图所示的四个大方格(绿色方格区域)内的细胞进行统计,将4个大方格内的细胞数完求和,随后总数除以4,再乘以即可算出每毫升样本中的细胞数量。

二、手工计数操作要点

细胞计数是细胞工作者一项基本功,现在市面上还有一次性的塑料计数板,只需要准备好细胞直接滴加到计数室即可。其原理依旧与以上玻璃计数板相同,接下来镜下数细胞的过程也是完全一样;即使使用高大上的细胞自动计数仪,还是要有一个规范的细胞样品准备和滴加过程,只不过是机器代替你数细胞和做算术而已。

小小技能,大大乾坤。细胞计数这关过不了,细胞学相关实验,比如单抗细胞融合,有限稀释亚克隆这些你就玩不转了。

所以,各位小伙伴,这一门传统但未过时的手艺,你学会了吗?

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