和免疫细胞的冻存复苏法：细胞冻存最常用的技术是液氮冻存，主要采用慢冻法，加适量保护剂。当细胞在没有任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会迅速形成冰晶，引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度升高，pH值改变，部分蛋白质因上述原因变性，导致细胞内部空间结构紊乱。溶酶体膜受损，溶酶体酶释放，导致细胞内结构成分受损，线粒体肿胀，功能丧失，能量代谢紊乱。细胞膜上的脂蛋白样复合物也容易被破坏，导致细胞膜通透性的改变和细胞内容物的流失。如果细胞内形成更多冰晶，随着冷冻温度的降低，冰晶的体积膨胀会对核DNA的空间构型造成不可逆的破坏，导致细胞死亡。
因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能减少细胞内的水分，减少细胞内冰晶的形成。甘油或二甲基亚砜用作保护剂。这两种物质分子量小，溶解度高，易渗透入细胞，能降低冰点，提高细胞膜对水的通透性，对细胞无明显毒性。慢冻法还可以使细胞内的水分渗出细胞外，减少冰晶在细胞内的机会，从而减少冰晶对细胞的伤害。
细胞复苏的主要操作方法：(1)戴眼镜和手套，从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。(2)迅速放入38水浴中，不时摇动，使其在1分钟内完全融化，然后在无菌状态下取出细胞。(3)以r/min的速度离心5~10分钟，弃去上清液，加入适量培养液，然后接种于培养瓶中，接种浓度为/L，置于37培养箱中静置培养，次日更换培养液，继续培养，观察生长情况。如果细胞密度高，及时传代培养。或者不经离心直接将细胞加入瓶中，加入培养基单层培养12-24小时，灌满上清液，换上新鲜培养基继续培养。