细胞周期和DNA合成的研究对许多科学领域都至关重要。传统上,放射性标记的胸苷被用于追踪新的DNA合成和细胞激增尽管相当敏感,但使用放射性标记的胸苷有以下局限性:管理、处理和处置放射性同位素,通常需要昂贵的检测设备。最近,胸苷类似物5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)被用来代替放射性标记的胸苷,并结合到新合成的活跃增殖的DNA链中细胞。在固定和部分变性细胞DNA后,可以检测到BrdU其允许分析活细胞新DNA合成。
艾美捷BrdU细胞增殖检测试剂盒化验原理:
细胞选择BrdU细胞增殖ELISA试剂盒检测掺入细胞DNA的BrdU在使用抗BrdU抗体的细胞增殖期间。当细胞在含有BrdU,嘧啶类似物取代胸苷被并入新合成的DNA中增殖细胞(下图)。一旦去除标记介质,细胞就被固定,DNA就被用固定/变性溶液一步变性(需要变性DNA以改善并入的BrdU用于检测的可接近性)。然后是抗BrdU小鼠单克隆抗体加入抗体,然后加入HRP缀合的二级抗体以检测掺入的BrdU。显影颜色的吸光度大小与BrdU的量成正比并可与细胞增殖直接相关。
图:细胞选择示意图BrdU增殖ELISA
艾美捷BrdU细胞增殖检测试剂盒相关研究:
1.CBA-细胞选择细胞活力和细胞毒性试验
2.CBA-细胞选择96井Anoikis分析
3.CBA-细胞选择细胞增殖测定试剂(比色法)
艾美捷BrdU细胞增殖检测试剂盒套件组件:
1.XBrdU溶液(零件号):一个30L小瓶10mMBrdU。
2.抗BrdU单克隆抗体(零件号):一瓶10L小鼠抗BrdU抗体。
3.固定/变性溶液(零件号):一瓶20mL。
4.抗体稀释剂(零件号):一瓶50mL。
5.二级抗体,HRP缀合物(零件号):一个20L小瓶。
6.10X洗涤缓冲液(零件号):一瓶mL。
7.基质溶液(零件号):一个12mL琥珀瓶。
8.停止溶液(零件号):一瓶12mL。
相关文献:
1.ShoghiKI,XuJ,SuY,HeJ,RowlandD,YanY,GarbowJR,TuZ,JonesLA,HigashikuboR,
WheelerKT,LubetRA,MachRH,YouM..()PLoSOne.8:e
2.GongF,WangG,YeJ,LiT,BaiH,WangW()OncolRep.30:-
3.Piastowska-CiesielskaAW,KozowskiM,WagnerW,DomińskaK,OchdalskiT.()Arch
MedSci.30:-.
4.LiangXH,LiLL,WuGG,XieYC,ZhangGX,ChenW,YangHF,LiuQL,LiWH,HeWG,
HuangYN,ZengXC.()BMCCancer13:
5.ImramovskA,JordaR,PaukK,RezníkováE,DuekJ,HanusekJ,KrytofV()EurJMed
Chem68:-.