AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是：肌球蛋白重链10(MYH10)基因沉默通过抑制Wnt/b-Catenin通路减少U、T98G和SHG44中的细胞迁移和侵袭。
肌球蛋白重链10或MYH10基因编码非肌肉肌球蛋白IIB(NMIIB)，并参与肿瘤细胞迁移、侵袭、细胞外基质(ECM)产生和上皮间质转化(EMT)。本研究旨在通过基因沉默研究MYH10基因对体外正常人神经胶质细胞和神经胶质瘤细胞系的影响，并确定所涉及的信号通路。本研究研究了正常人神经胶质细胞系HEB和神经胶质瘤细胞系U、T98G和SHG44。质粒转染使MYH10基因沉默。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定评估细胞活力。使用划痕和transwell测定评估细胞迁移和侵袭。Westernblot检测蛋白表达水平，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测mRNA表达水平，对于MYH10、转移相关蛋白1（MTA-1）、基质金属蛋白酶（MMP）)-1、MMP-9、金属蛋白酶2(TIMP2)、胶原蛋白1、E-钙粘蛋白、波形蛋白、Wnt3a、b-连环蛋白和细胞周期蛋白D1的组织抑制剂。
研究结果表明，MYH10基因在U、T98G和SHG44细胞中过表达。在siMYH10质粒干扰后，MYH10表达下调，这也抑制了胶质瘤细胞的迁移和侵袭。MYH10基因沉默导致MTA-1、MPP-2、MMP-9和波形蛋白的表达降低，TIMP-2、E-钙粘蛋白和胶原蛋白1在蛋白质和mRNA水平的表达增加，并抑制Wnt/b-连环蛋白途径。总之，在人神经胶质瘤细胞系中，沉默MYH10基因通过抑制Wnt/b-catenin通路来减少细胞迁移和侵袭，这可能调节人神经胶质瘤中的ECM并抑制EMT。
Phosphataseinhibitors（Abmole，M）被用于防止研究中蛋白和脂类的磷酸化状态丢失，为蛋白磷酸化提供更加全面的保护，以更好地进行Westernblot等实验。
Figure1.ExpressionoftheMYH10mRNAandproteininU,T98G,andSHG44gliomacelllines.
结果表明，MYH10基因在HEB和胶质瘤细胞中均有表达，但MYH10基因在U、T98G和SHG44胶质瘤细胞系中的相对表达水平显著高于HEB细胞系（P0.05）。与U和SHG44胶质瘤细胞系相比，T98G胶质瘤细胞中MYH10基因的相对表达水平显着升高（P0.05）。
Figure2.EffectsofsiMYH10plasmidinterferenceontheexpressionlevelsofMYH10cellviability,cellmotility,andcellinvasionoftheT98Ghumangliomacellline.
结果显示转染后MYH10mRNA和蛋白表达水平显着降低（P0.01）。这些发现证实质粒构建和转染是成功的。
鸣谢：YangWang,etal.MedSciMonit.Dec15;24:-.