伯远医学是武汉伯远生物科技有限公司旗下全新开展的医学服务平台。伯远生物成立于年7月26日,位于东湖高新技术开发区光谷生物城武汉生物技术研究院B8栋。伯远生物专注于前沿分子生物学技术在生命科学研究和人类健康领域的应用和创新,致力于成为全球领先的基因科技产品和服务提供者。细胞凋亡(Apoptosis)即程序性细胞死亡(Programmedcelldeath,PCD),指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。是细胞的一种基本生物学现象,在生物体进化、内环境稳定以及多系统发育中起着重要作用,其涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用,具有可鉴别的形态学和生物化学特征。
背景说明
背景说明
流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术,它是集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)分布于细胞膜脂质双层的内侧,但在细胞发生凋亡早期,膜PS由脂膜内侧翻向外侧,暴露在细胞外环境中。AnnexinV是一种分子量为35~36KDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,可与PS高度亲和并特异性结合,被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但AnnexinV无法区分坏死细胞(中晚期凋亡细胞)和早期凋亡细胞。
碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)是一种核酸染料,不能透过完整细胞膜,但由于凋亡中晚期细胞和死细胞的细胞膜通透性增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整,PI无法进入凋亡细胞。
将AnnexinV与PI联合使用,即可将处于不同凋亡时期的细胞区分开来:活细胞(AnnexinV-/PI-)、早期凋亡细胞(AnnexinV+/PI-)、晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被AnnexinV和PI结合染色呈现双阳性(AnnexinV+/PI+)。
图AnnexinV/PI检测原理
服务流程
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养——细胞处理——细胞收集——AnnexinV孵育——PI孵育——流式细胞仪分析——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
服务内容及说明
适用范围
检测外界刺激(如药物处理)对细胞的影响。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
AnnexinV/PI双染色法的优点
1、简便、快速;
2、可准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。
AnnexinV/PI双染色法的缺点
1、制备贴壁细胞样品时,容易因消化和吹打造成细胞额外损伤,从而夸大了实验结果,增加了数据变异度。
2、凋亡细胞的本底荧光或非特异染色的特性会增强,导致荧光飘移,导致定量不准。
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、检测报告与结果分析(流式细胞仪下机数据、结果统计分析等);
3、具体实验报告。
文献示例
文献示例
图流式细胞仪检测细胞凋亡情况(Chenetal.,)。
参考文献
ChenJ,ChenX,FuL,ChenJ,ChenY,LiuF.LncRNAGACAT1targetingmiRNA-regulatesthemolecularmechanismofproliferation,apoptosisandautophagyoforalsquamouscellcarcinomacells.Aging(AlbanyNY).;13(16):-.