二、产品选择
德国MB有3种支原体祛除剂,均可用于细胞中支原体的祛除,但在使用方法和使用效果上略有不同。
ZellShield
复合抗生素成分,抑制支原体蛋白和DNA合成,也抑制细菌和真菌。
适合细胞已发生支原体污染,但又不愿丢弃,希望继续培养:如已转染或大量扩增的细胞的情况。
使用时需要采用悬浮冲洗法,并连续培养三代,关于悬浮冲洗法,往期文章中也有详细介绍:
如何祛除「普通细胞」的支原体污染?
消化细胞
离心
弃上清
PBS清洗细胞
低速离心弃上清
重复清洗3次
加入含有ZellShield的
新鲜培养基
Mynox
对于无法长期培养的珍贵样本或病毒收货液,则推荐使用德国MB公司的Mynox,处理3小时,直接杀除。关于Mynox的产品特点往期文章也有介绍:
「珍贵细胞」遭遇支原体污染,揭秘拯救全过程
使用方法:
(1)细胞重新传代时,用含Mynox、5%FBS的的培养基替换原有培养基,对细胞进行培养
(2)孵育培养2-3小时
(3)对细胞进行换液
(4)用不含Mynox的正常培养基(原始培养条件)对细胞进行培养,传代3-4次
(5)对细胞进行支原体检测
MynoxGold
若是可以培养超过一个月的细胞,则推荐使用德国MB公司的MynoxGold,直接杀除+巩固防护两步处理,祛除支原体的同时,可进一步在后续培养中巩固清除效果,防止支原体“卷土重来”。MynoxGold的产品特点往期文章也有介绍:
「珍贵细胞」遭遇支原体污染,揭秘拯救全过程
使用方法:
(1)治疗液与含5%FBS的培养及混合
(2)将混合后的治疗液添加至培养皿中
(3)将接种细胞
(4)培养细胞至80%-90%汇合后,进行传代
(5)传代的同时加入巩固液
重复(4)(5)两次
(6)再无MynoxGold的情况下传代
(7)用VenorGem支原体检测试剂盒检测