原理：为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
MTT步骤如下：
1、接种细胞：用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔-0个细胞接种到96孔板，每孔体积ul。
2、培养细胞：同一般培养条件，培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。
3、呈色：培养3-5天后，每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS配)20ul。继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加ulDMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。
4、比色：选择nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强（如果是测药物*性，则表示药物*性越小）。
此法中的MTT浓度为5mg/ml。因此，可以称取MTT0.5克，溶于ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。
参考公式：
lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)
Xm:lg最大剂量
I:lg(最大剂量/相临剂量)
P:阳性反应率之和
Pm:最大阳性反应率
Pn:最小阳性反应率
抑制率=1-加药组OD值/对照组OD值
公式中的最大最小阳性反应率就是最大最小抑制率