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TUhjnbcbe - 2023/2/5 18:32:00

培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。

那么关于培养基这个系列,大家或许会遇到一些疑难杂症,小艾整理了一下关于这个系列的普遍问题,大家可以看一下

如何选择不同葡萄糖含量的培养基?

作用:葡萄糖是细胞生长所需的主要能量来源。

*最初的DMEM中,葡萄糖浓度为1g/L,现在称其为低糖型DMEM,适合培养多数哺乳动物细胞;

*高糖型DMEM中的葡萄糖浓度为4.5g/L,适合生长速度快,附着性较差的肿瘤细胞;

*使用无糖培养基的主要目的是,通过控制细胞的能量来源,研究细胞的代谢过程或葡萄糖利用效率。

培养基——HEPES

作用:pH缓冲剂。

*是一种氢离子缓冲剂,其作用不依赖于CO2;

*在一定范围内对细胞无*性作用,能较长时间控制恒定的pH范围,保证细胞良好生长;

*部分细胞对酸碱度的变化非常敏感,建议使用HEPES;

*价格高,非必需。

培养基——L-谷氨酰胺

作用:L-谷氨酰胺是一种氨基酸,细胞的重要能量来源,参与蛋白质的合成,也为合成核酸提供碳源。

存在的问题:

*L-谷氨酰胺不稳定,在中性的水溶液中会自发降解;

*降解产物氨对细胞有*性;

*对氨敏感的细胞(如干细胞和原代细胞等)或培养环境(高密度反应器,无补料的长期培养)不推荐含L-谷氨酰胺的培养基。

何时选择不含酚红的培养基?

作用:pH值的指示剂(中性时为红色,酸性时为*色,碱性时为紫色)。

*培养干细胞或细胞克隆时倾向于不加酚红;

*酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素);

*酚红的颜色会干扰流式检测,不建议使用含酚红的培养基制备细胞样品(通常用PBS)。

培养基——碳酸氢钠

作用:pH缓冲剂。

*pH6.8-7.8为细胞生长的最佳pH条件;

*多数培养基利用碳酸氢钠进行缓冲;

*碳酸氢钠的缓冲需要CO2

–高碳酸氢钠(1.5–3.7g/L)需要5–10%CO2

–低碳酸氢钠(0.35g/L)不需要CO2培养箱

*干粉培养基在配制时需要单独添加。

培养基——丙酮酸钠

作用:能量来源。

*丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源;

*葡萄糖不足的时候,细胞可以代谢丙酮酸钠;

*保证细胞更好地生长;

*非必需组分。

液体培养基与干粉培养基的特点

液体培养基——即用型

*无需配制或过滤,可直接使用;

*批次间稳定性高;

*单价较高。

干粉培养基——需配制

*干粉形式性质稳定,效期较长;

*使用前需自行配制;

*需要单独添加碳酸氢钠;

*需过滤,引入额外操作且消耗滤器;

*单价相对液体培养基低。

文章来源:每日生物评论

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