生物实验中,无菌操作知识必不可少,特别在细胞培养实验中,无菌操作尤其重要,下面我为大家总结归纳了细胞实验培养无菌操作的注意事项,希望大家喜欢。
实验前要对试验台进行紫外消*灭菌;所有用品要使用高压蒸汽灭菌;双手进行操作时,要进行75%酒精消*;实验仪器过火处理。
1.实验操作之前,要做好准备,合理布置台面,实验步骤要事先确定好,不要手忙脚乱,防止多次取用东西会带来染菌几率。
2.先将移液管和枪头、离心管以及移液枪准备好,放在超净工作台上紫外灭菌1h,提前水浴培养基30-60min。
个人穿戴设备要准备好,一次性手套要严格佩戴,切记不要交叉感染。
1.超净台里面的物品按照左右手原则摆放,不要在需要处理的细胞上面操作,严格按照实验规程操作,不要扰乱顺序。
2.无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。操作时,盖子(培养瓶盖、培养基盖等)操作尽量放置在远离中央操作区域,且自己的双手不能过瓶身中央。
3.实验用品以70%酒精擦拭后才带入无菌操作台内。细胞培养实验操作应在台面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
不同种细胞要分开操作,不要混合操作,避免交叉感染,否则容易导致两类都会产生污染,影响实验。
1.小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。瓶口避免垂直放置,加液时吸管尖碰到瓶口时,应将吸管丢掉。
2.容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
3.用镊子取出离心管,不要直接用手拿。
4.从培养瓶取细胞时,瓶口太深,应用电动移液枪取细胞,而不是直接用手动移液枪。刻度转向自己。
5.取细胞之前,一定要摇匀培养瓶,以免导致实验误差。
6.手如果离开超净工作台外,需要喷酒精消*,必要时,要换手套。
7.使用电子移液枪中。移液管刻度应朝着自己能够看清的方向。
8.不要太过匆忙,要有一个好的节奏以及从容的动作。不要重复使用吸管。
9.用台盼蓝溶液检测细胞含量时,吹打细胞,不易太快,不易太轻,一定要适中。太快太久,导致细胞死亡,太轻,细胞与溶液混合不均匀,细胞结团,影响细胞检测实验结果。