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TUhjnbcbe - 2023/2/10 14:36:00

具中科博生研究表明,由于动物细胞体外培养特性的缺陷,动物细胞大规模培养技术仍难以满足某些生物制品规模生产的需求,还需要进一步改进细胞培养工艺。

细胞培养中细胞周围环境的抑制细胞生长的物质的积聚是限制细胞髙密度生长的主要彫响因素,如氨离子的积累、乳酸和C02浓度过高等对细胞的生长都会产生不利的影响。氨的积聚使细胞内UDP氨基己糖浓度増加,影响了细胞的生长及蛋内的糖基化过程。中科博生。

氨抑制了谷氨酸代谢途径,使天冬氨酸和谷氨酸消耗增加。氨来源于两方面:直接来源于培养基,还由细胞代谢产生。但两者都涉及谷氨酰胺的利用,因此需要防止培芥基中谷氨酸自然分解,限制谷氨酸用量。并尽致去除培养基中的氨。乳酸是细胞糖代谢的产物,高浓度乳酸会抑制乳酸脱氢酶(LDH),LDH受抑制后导致NADH增加,NADH的增加部分抑制了糖酵解过程。中科博生。

氨和乳酸对细胞的*性作用已在多种的细胞系有大量报道,不同细胞系对于这两种代谢产物的耐受性差别很大,原因可能是不同细胞系葡萄糖和谷氨酰胺代谢过程中关键酶的敏感性不同。随着细胞培养规模和培养密度的増大,CO2的产生速率超过从培养基中换气去除CO2,因而导致CO2积聚,对细胞产生*性作用。控制通气参数,平衡氧的输送及CO2的去除,防止生物反应器中CO2积聚,尽可能防止高浓度CO2对细胞生长的不利影响。中科博生。

大规模细胞培养的后期,一些细胞系会在生物反应器中发生细胞凋亡。细胞凋亡的发生被认为是大规模细胞培养过程的重要制约环节,预防并控制细胞凋亡,因此成为大规模细胞培养中的研究重点。用基因工程方法将细胞凋亡抑制基因导入细胞,或延长细胞周期中G1期(细胞静止),均可提高外源基因在动物细胞的表达蛋白量。中科博生。

动物细胞生物反应器的操作环节多、周期长、材料消耗大,一旦污染将造成人力、物力和时间的极大浪费,因此,在整个培养过程中特别注意微生物的污染问题。对密封垫圈、空气滤器等渉及反应器密闭的部件应经常检査,定期更换。培养罐的高压蒸汽灭菌应根据培养罐的结构、大小严格按照相应的操作手册的要求进行。当培养细胞达到较高的密度时,为维持适宜的溶氧,应提高气体供应的流量和压力,但还应适当控制通气管的内压以防管壁破裂。

中科博生期待大家一起探讨学习。

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