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TUhjnbcbe - 2023/3/2 19:07:00
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细胞存是把暂时不用的细胞放在-80℃超低温咸液氮中储存,这个状态细胞代射停滞,可以保存较长时间。为了防止冷冻过程中细胞内产生冰晶破坏细胞,应该遵循缓冻速融的原则,冻的时候从4℃开始,转到-20℃再转到-80℃,最后到液氮。现在一个冻存盒就可以直接放在-80℃冰箱里。

实验开始前照例开超净工作台的紫外灯照半小时。

准备好要用的东西:贴壁培养的细胞,胎牛血清,二甲基亚枫DMSO,胰酶,10mL离心管,冻存盒和冻存时用的小管子,移液管

操作流程

先把试剂瓶的封条都打开,方便实验时取用

配冻存液:胎牛血清和DMSO10:1,10个冻存管每个1mL,考虑到移液时损失要多配1mL。操作时注意手不要从敞口的试剂瓶口上方经过,拧上盖子时盖子和瓶口在酒精灯上灼烧。

贴壁培养瓶倒去培养液,PBS清洗三遍,胰酶消化1min,看到糙瓶面有固体流下就可以了。倒掉胰酶,取配好的冻存液吹打,然后就移到冻存管里就OK了。

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