生物制药公司（Replicor）的科学家在最近一次科学会议上，进一步描述了解寡核苷酸类药物在慢性HBV感染中的作用机制。
寡核苷酸疗法对循环HBsAg的影响
乙肝寡核苷酸类药物，Replicor科学家介绍，ASO/siRNA作用机制
研究人员认为，对合成干扰RNA（siRNA）治疗反义（ASO）过程中对乙肝表面抗原（HBsAg）的调降机制理解，主要受到啮齿动物体内模型限制、不同的传递途径对寡核苷酸在实质细胞和非实质细胞中积累影响、寡核苷酸的免疫刺激特性以及寡核苷酸修饰如何影响这些特性。考虑到这些变量，在科学会议上提出了迄今为止，这些乙肝候选药物对HBsAg反应的全球分析。
结果表明，人体对GalNAc-ASO和GalNAc-siRNA的药效学反应和ASO/siRNA效应剂量饱和度没有区别。单点突变同样会消除ASO和siRNA的活性。因此，HBsAg对ASOs的反应告知了HBsAg对siRNA的反应机制，反之亦然。HBV感染在基因上具有高度可塑性，允许ASO和siRNA逃逸突变体的快速进化。HBV感染的这一特征仅在鸭和土拨鼠中得到很好模拟。
LNP-siRNA治疗WHBV感染土拨鼠过程中病*血症的反弹(TekmiraDIA)
在对WHV感染的土拨鼠进行LNP-siRNA治疗过程中，病*血症的反弹表现出具有多个触发器的逃逸突变体的快速进化。这在经核苷（酸）类似物（NAs）抑制的慢性HBV感染中得到证实，在S和X中结合了三个LNP-siRNA触发器（ARB-）。
经核苷类抑制TKM-HBV的慢性HBV病*血症反弹(ARB-)(AASLD)
siRNA从LNP到GalNAc结合的转变驱动双链RNA（dsRNA）大量暴露于非室间细胞(窦内皮细胞[LSECs]和Kupffer细胞[KCs])，引发更强的TLR3激活。
siRNA对TLR3的刺激与序列无关。寡核苷酸修饰降低TLR反应性也阻断了RISC负载和RNAi效应
在第一剂GalNAc-共轭siRNA或GalNAc-共轭ASOs后15天，肝脏靶蛋白高度保守地下降90%，这在许多肝脏靶点的临床中已得到证实，但在siRNA和ASOs的HBsAg中都没有出现这种情况。
临床研究中观察到的HBsAg对以寡核苷酸为基础的治疗的反应总结
HBsAg对目前正在开发的所有GalNAcRNAi（AB-、JNJ-、VIR-、RG）的反应同样高度且普遍延迟。与小鼠中dsDNA介导TLR3刺激的延迟HBsAg反应一致。HBsAg亚型反应现实S-HBsAg没有选择性下降，这表明HBV亚病*颗粒不受siRNA的影响。以AB-为例，未观察到与SVP靶向一致的选择性S-HBsAg亚型下降。M-和L-HBsAg的选择性下降，表明cccDNA失活或自噬增强（EASL）。在使用相同检测平台的临床研究中，使用核酸聚合物（NAP）可观察到选择性S-HBsAg下降。
HBsAg对Gal-NAcsiRNA的亚型应答
葛兰素史克公司与IonisPharmaceuticals合作研发的Bepirovirsen（GSK）是一种未偶联非结合ASO，包含II类CpGmotif(TLR9刺激），70%的肝剂量积聚在非实质肝细胞。GSK是一种完全磷酸化的寡核苷酸，通过末端的2MOE修饰阻止TLR7/8的刺激，并在其无保护的DNA核心中包含TLR9刺激基序，与TLR9刺激一致的免疫活性发生在Bepirovirsen。
这种寡核苷酸（GSK）在非实质细胞中的积累导致HBsAg强烈下降，宿主介导的转氨酶耀斑仅限HBsAg较低受试者（HBsAgIU/mL）。当这种寡核苷酸是通过GalNAc偶联结合技术开发（指GSK）作用于肝细胞时，上述这种作用就不存在了。
bepirovirsen的奇特案例
小番健康结语：这是Replicor公司在最近一次科学会议上，详细介绍寡核苷酸药物在慢性HBV感染中的作用机制。Replicor公司科学家的结论是，在体内试验和临床开发数据表明，HBsAg对siRNA或ASO的应答是由先天免疫刺激驱动的！饱和的乙肝表面抗原水平随着siRNA而下降，这反映了来自整合HBVDNA的HBV亚病*颗粒（SVP）的持续存在，在评价这些新机制候选药物时（siRNA或ASO），必须把它们的免疫反应特性考虑在内。