细胞

首页 » 常识 » 常识 » SHSY5Y细胞培养攻略
TUhjnbcbe - 2023/3/15 20:38:00
北京治疗白癜风要多少费用 http://m.39.net/pf/a_4573521.html

SH-SY5Y细胞是于年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经3次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。SH-SY5Y细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。

细胞简称:SH-SY5Y

产品货号:TCH-C

种属来源:人

组织来源:脑

疾病特征:脑神经母细胞瘤

细胞形态:上皮样 

生长特性:半贴半悬

培养体系:MEM/F12+15%FBS+1%P/S

配套培养基货号:TCH-G

传代比例:1:3-1:4,每2-3天换液一次

传代周期:48-72h

培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

冻存条件:60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO,液氮储存

SH-SY5Y细胞生长缓慢注意要点SH-SY5Y细胞生长缓慢。在培养过程中,有以下几点需要注意:MEM/F12和DMEM/F12都可以培养SH-SY5Y,并且都有相应的文献支持。但这两种培养基培养出来的形态会有细微差异。另外,使用品质好的胎牛血清将极大改善细胞生长状态。因其神经母细胞瘤的特性,SH-SY5Y细胞成簇生长,饱和密度大。有时显微镜下看着密度不高,但细胞簇实际密度大,所以培养基很快就变*了。这时候,需及时换液。当细胞培养一周都无法传代时,可以将细胞消化下来,接种到更小的容器中,人为增加细胞密度,从而促进细胞生长。平时传代时也要注意接种密度不能太低。

不建议连续消化细胞,连续消化细胞会导致细胞状态变差。传代时消化时间不宜过长,通常1-3min即可,若细胞解离太快可适当用PBS稀释胰酶。吹打细胞时,动作轻缓一些,减少对细胞的物理刺激。

如何预防SH-SY5Y细胞成团SH-SY5Y细胞非常敏感,在受到温度、化学或物理刺激后容易出现成团现象。一个视野下,有少量成团现象,无需特殊处理。成团几乎没有铺展开的细胞时,就需要按以下方法特殊处理一下了。成团处理方法方法1:低密度接种,用0.%的低浓度胰蛋白酶消化细胞(时间不超过5min),按1:6比例传代接种,并换新的培养器皿。延长换液时间,3天换液一次,防止细胞脱落。方法2:使用多聚赖氨酸包被的培养器皿,以加快细胞贴壁速度,降低细胞聚集成团的几率。

方法3:重新铺板,并更换新配制的培养基,并加大血清比例(不超过20%)

方法4:接种时,减少培养基量(如T25加3mL)以加快细胞贴壁速度,等待细胞贴壁后(约8-12小时),再补加培养基。

预防成团的方法:

·控制细胞密度不超过80%,当密度到达或超过80%及时传代;传代时切勿暴力吹打,避免对细胞造成机械刺激

·使用质量好的培养基和胎牛血清,减少内*素等有害物质对细胞的刺激

·请勿频繁把细胞从培养箱拿出,气温低时需开暖气维持细胞房温度;使用PBS、培养基前37度预热,以避免温差对细胞造成刺激

SH-SY5Y细胞出现皱缩、脱落如何处理?SH-SY5Y细胞出现皱缩处理方法

常温细胞拿到后,把细胞放进培养箱静置2-4小时即可。

如果4小时后细胞仍然没有铺展开,密度适中的前提下可以放培养箱中静置过夜(过夜前倒出部分培养基,留5-10mL在瓶中,瓶盖拧松)。

SH-SY5Y细胞出现脱落处理方法

常温细胞拿到后,先把细胞放进培养箱静置2-4小时以稳定状态再处理。

脱落后的细胞通常聚团漂浮,通过离心将漂浮的细胞团收集起来,在离心管里进行胰酶消化后重新铺板即可。

作者:海星生物以上内容由海星生物(

1
查看完整版本: SHSY5Y细胞培养攻略