甲基绿-派洛克染色液
产品货号:R
产品规格:ml/ml
产品简介:
甲基绿-派洛宁染色液(MethylGreen-PyroninStain,MGP)甲基绿-派洛宁染色液是一种把细胞核染成绿色或蓝绿色,把细胞浆和细胞核中的核仁染成红色或红紫色的染色液。甲基绿又称双绿SF,属于碱性染料,是具有金属光泽的绿色微结晶或粉末,分子量为.78,分子式为C27H35Cl4N3Zn。甲基绿和细胞核中的DNA结合,从而使细胞核染成绿色或蓝绿色,派洛宁可以和细胞浆或核仁中的RNA结合,从而使细胞浆和核仁染成红色或红紫色。
甲基绿-派洛宁染色液经过改良,不含甲醇,在组织或细胞染色中对细胞核进行染色,其中的甲基绿经过提纯,更容易着色。本染色液也可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。10ml染色液可以染色20个样本。
产品组成:
自备材料:
1.系列乙醇
2.蒸馏水
3.滤纸
4.丁三醇或丙酮或正戊醇
5.4%多聚甲醛
6.RNase(可选)
操作步骤:(仅供参考)
(一)石蜡切片染色
1.组织入Carnoy固定液或10%中性福尔马林,固定3~5h。
2.切片5μm,常规脱蜡至水,蒸馏水稍洗。
3.切片入MethylGreen-PyroninStain,室温浸染30~60min。
4.取出切片,用滤纸稍微吸干切片周围染色液。
5.用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)冲洗3次,每次2~3min。
6.二甲苯透明.
7.中性树胶封固。
(二)冰冻切片染色
1.蒸馏水冲洗。
2.切片入MethylGreen-PyroninStain,室温浸染25~50min。
3.用蒸馏水冲洗2次,此时样本呈蓝色。
4.余下步骤同石蜡切片染色。
(三)细胞染色
1.用4%多聚甲醛固定10min以上。
2.蒸馏水洗涤2min。
3.换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2min。
4.用MethylGreen-PyroninStain染色5~10min。
5.显微镜下观察。
(四)荧光染色
1.如果进行免疫荧光染色,在染色后应乙醇洗涤2次,每次2min。
2.乙醇脱水2min。
3.PBS或生理盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡。
4.进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。
染色结果:
阴性对照:
1.取另外一张连续切片入RNase(1mg/ml),37℃恒温箱内孵育3h。
2.蒸馏水冲洗干净。
3.入MethylGreen-PyroninStain染色,余下步骤同上。
4.RNA染色结果为阴性。
注意事项:
1.首次使用染色液建议先取1~2个样品预实验。
2.MethylGreen-PyroninStain染色可以根据染色结果和要求调整时间。
3.有些粘液细胞有可能被派洛宁染成红色,应注意区分。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。