1、原理
感受态是指受体细胞易接受外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态。感受态由受体细胞的遗传性状所决定的，受菌龄、外界环境因子的影响。cAMP可提高感受态水平一万倍，而Ca2+存在也可大大促进转化的作用。新鲜，幼嫩的细胞是选择做感受态细胞的佳材料。
带有外源DNA的重组质粒，在体外构建后，导入宿主细胞，随着细胞的大量复制、繁殖，才能够有机会获得纯的重组质粒DNA，该过程称之为转化过程。受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，能容许外源DNA的载体分子通过。感受态细胞在0℃，CaCl2的低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，而转化混合物中的DNA形成抗DNase（DNA酶）的羟基--钙磷酸复合物，并粘附于细胞表面，经42℃短时间热冲击处理，可促使细胞迅速收缩，吸收DNA复合物，完成转化。
大肠杆菌菌落（来源：百度）2、大肠杆菌DH5α感受态制备实验步骤：
（1）从-80℃冰箱中取出保种的DH5α菌株，用灭菌的枪头吸取少量保菌液加入至合适的LB液体培养基中，在LB固体培养基进行涂板处理，置于37℃培养箱中过夜培养。
（2）次日，从LB固体培养基上挑取湿润，圆滑的大肠杆菌单菌落，接种于无抗生素的5mlLB液体培养基中，37℃下振荡培养过夜，至对数生长后期。将该菌悬液以1:～1:50的比例接种于mlLB液体培养基中，37℃振荡培养2-3h至OD＝0.3-0.5左右。（注：此步必要时可在显微镜下镜检菌细胞是否形态一致，有无杂菌污染。）
（3）在无菌条件下将菌液转移到冰上预冷的离心管中，冰上放置10-30min，使培养物冷却至0℃，然后4℃，rpm/min离心10min；（4）弃掉上清，倒置1min，以便将培养液流尽；（5）用冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液10ml轻轻悬浮细胞，充分混匀，冰上放置30min后，4℃下rpm/min离心10min；（6）弃掉上清，并倒置1min，以便最后的培养液流尽；（7）加入4ml预冷含15%甘油（已灭菌处理）的0.1mol/L的CaCl2溶液，轻轻悬浮细胞，冰上放置几分钟，即成感受态细胞悬液；（8）感受态细胞μL分装，贮存于-80℃保存备用。
3、注意事项：
（1）为制备转化效率较高的感受态细胞，可将保种液用于制作感受态细胞。
（2）注意挑取LB固体培养基上湿润，圆滑的克隆，以防挑取杂菌。
（3）进行二次培养的时候，摇床转速应选择较低转速，空载转速在-rpm/min左右。
（4）制作感受态的过程中尽量冰上操作，操作的动作尽量轻柔，稳健；试验中所用的试剂，转子，离心机需要提前预冷。
文章来源：每日生物评论
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